自身免疫性肝病及其实验室诊断
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(一)自身抗体的检查AILD患者的血清中常会出现一些特征性的自身抗体,对于与其他各种肝炎鉴别诊断是极为重要的。其中ANA、SMA、LKM最为常用。常用的测定方法有间接免疫荧光法(IFT)、免疫印迹法和放射免疫测定法(RIN)。

1、抗核抗体(ANA)采用HEp-2细胞为基质的间接免疫荧光试验分析,AIH患者为阳性,其荧光模式多为均质型,成人患者滴度一般>1:80,而小儿患者的滴度只要>1:20即可认作阳性。尚未鉴定出AIH特异性的ANA靶抗原。出现多核点(MND)型或核轮圈型的荧光模式则为PBC的特征。Sm抗体和抗SS-B抗体等抗ENA抗体也会在某些1型AIH患者中出现。   

2、抗肝肾微粒体(LKM)抗体可分为针对不同靶抗原(LKM-1、LKM-2和LKM-3等)的亚型,这些靶抗原为一组细胞色素P分子,抗LKM-1抗体的靶抗原为细胞色素Pdb1(ⅡD6),抗LKM-1抗体与Ⅱ型AIH有关。

3、抗平滑肌抗体(SMA)年Johnson首先用免疫荧光法在慢性活动性肝炎患者中发现该抗体,主要的靶抗原为肌动蛋白(F、G),用该法测定若滴度>1:40即可判断为阳性。高滴度(>1:)为抗F-肌动蛋白自身抗体对于诊断Ⅰ型AIH的特异性几达%,低滴度见于抗G-肌动蛋白抗体(与酒精性肝硬化有关)或抗非肌动蛋白抗体(与病毒性肝炎有关)。

4、抗线粒体抗体(AMA)最早在原发性胆汁性肝硬化患者中用免疫荧光法(滴度>1:80)发现,有9种靶抗原(系含氧脱氢酶多酶复合体的成分)M1-M9,抗M2抗体的特异性最好(PBC达96%,其他慢性肝炎30%,系统性硬化7%~15%),抗M4和M8的抗体在PBC中为55%,抗M9抗体在早期PBC患者(M2阴性)中阳性率达到82%,针对M1(梅毒%,SLE50%,其他风湿病5%~15%)、M3(药物性狼疮%)、M5(胶原病)、M6(药物性肝炎%)和M7(急性心肌炎60%,心肌病30%)的抗体特异性更差。

5、抗可溶性肝抗原抗体(SLA)是Ⅲ型AIH的标志性抗体,也是HIA唯一特异的自身抗体。用标准的间接免疫荧光法不能检测抗SLA自身抗体,将靶抗原克隆出来,建立ELISA和免疫印迹法就能可靠检测该抗体,并能进行分型。

6、抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)常用酒精固定的人中性粒细胞作为基质片,通过间接免疫荧光法测定ANCA,主要表现三种荧光图形(核仁形、核周型、斑点型),有报道此抗体在AILD中有一定的阳性率,但特异性不高,AIH为36%~83%,PBC为26%~39%,PSC为44%~67%。以核周型为主。尽管对于PSC也只有中等的敏感性和特异性,但至今仍然是此病的唯一血清标志。

7、抗去唾液酸糖蛋白抗体(ASGPR)以从人或动物肝组织提取的ASGPR为靶抗原,用ELISA或RIA法进行检测,也可用免疫印记法,ASGPR为AIH特异性抗体。医学教.育网搜集

(二)肝功能检测

1、酶类的检测ALT持续反复增高,为正常的3~5倍以上,且ALTAST,GGT、ADA亦有不同程度的增高。

2、蛋白类检测白蛋白正常,球蛋白增高(γ-球蛋白),以IgG增高最为明显,其次为IgM、IgA。

3、血清胆红素明显增高。

五、AILD的临床实验室诊断

AILD的临床实验室诊断应当包括免疫球蛋白测定、肝功能测定、以上所述的自身抗体测定以及肝活检。所有这些病人的血清免疫球蛋白都明显增高,都可有肝功能异常,对于PBC和PSC患者多有胆红素和胆汁酸的增高。

(一)自身免疫性肝炎的实验室诊断要点存在肝炎的血液生化检验及病理学证据,血清碱性磷酸酶不如血清转氨酶增高明显;存在相关的自身抗体及高丙种球蛋白血症(初期主要表现为血清中IgG升高),血沉增高;一般各型肝炎病毒感染的血清学指标阴性,但要注意与病毒性肝炎的重叠;患者有遗传倾向,可表达HLA-B8、DR3或DR4抗原;免疫抑制治疗后症状减轻,应排除药物性肝病、酒精性肝病、代谢性肝病,以及PBC和PSC,但需注意它们的重叠综合征。国际自身免疫性肝炎团体(IAHG)年公布修订的AIH诊断标准。虽有少数AIH患者(约5%)自身抗体为阴性,但自身抗体对AIH的诊断具有很重要的意义。

(二)原发性胆汁性肝硬化的实验室诊断要点存在多核点型的抗核抗体以及AMA为其最重要的特征,高滴度的AMA-M2自身抗体通常具有重要诊断价值;同样也存在高丙种球蛋白血症;此外,血清胆固醇和脂蛋白、血清结合珠蛋白和血清胆红素浓度增高以及血管紧张素转化酶活性增高都是该病的特有表现。抗M4和抗M8抗体见于PBC晚期,抗M9则见于PBC早期且预后良好。

(三)原发性硬化性胆管炎的实验室诊断要点高丙种球蛋白血症,成年患者以IgM为主,但儿童患者却多为IgG升高。大约有60%~80%的患者表达HLA-B8(对照为25%),70%~75%表达HLA-DR3(对照为19%)。该病患者相当比例并发溃疡性结肠炎(约60%),呈进行性病变,这些病例都可检出抗结肠抗体,若单纯溃疡性结肠炎该抗体的阳性率只有17%;大约有84%的患者pANCA阳性,且滴度很高(平均为1:),它可能与疾病的活动有关。患者CIC、C3、C4、肝脏酶谱和胆红素一般都增高。此病的诊断需排除胆道其他疾病(如胆结石)。

自身免疫性肝病正日益受到临床的重视,这类疾病还可以病毒性肝炎重叠并发,一些病毒感染的血清学指标有可能掩盖已经存在的自身免疫性肝病。因此,对一些长期肝功能异常,免疫球蛋白增高(尤其对免疫抑制疗法有效)的慢性肝病患者应进行自身免疫性肝病的实验室诊断。其中ANA、SMA、LKM最为常用,以便尽早诊断及时治疗。

自身免疫性肝病的实验室诊断为早期诊断提供了有效的、非介入的诊断方法,但是肝活检仍然是这类疾病的确诊工具,以上介绍的方法被称为活检前诊断,是目前主要的过筛检查。凡被实验室诊断为自身免疫性肝病的患者,在正式进入临床治疗前,建议进行肝活检,以避免可能出现的误诊。

来源:检验医学网

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